パークに登場するキャラクターは、メイン・キャラクターのウッディー・ウッドペッカーの他、セサミストリートやピーナッツ、ハローキティなどが活躍している。開業10周年となった2011年にはセサミストリート?の新しいキャラクター、モッピーが登場した。2014年はウィザーディング・ワールド・オブ・ハリー・ポッターのオープンを機にハリー・ポッターが、2017年にはミニオンズが登場した。

ユニバーサル・スタジオ・ジャパンは「ユニバーサル・ピクチャーズ」が配給している映画をテーマにしたアトラクションが多数導入されている。それ以外にも「ユニバーサル・ピクチャーズ」配給ではない多数の映画や作品も登場している。また「スペース・ファンタジー・ザ・ライド」のようにパークオリジナル作品も存在する。

原作作品アトラクション
セサミストリートセサミストリート4-Dムービーマジック
ユニバーサル・ワンダーランド
シュレックシュレック4-Dアドベンチャー
SING/シングシング・オン・ツアー
おさるのジョージプレイング・ウィズおさるのジョージ
ビートルジュースユニバーサル・モンスター・ライブ・ロックンロール・ショー
ユニバーサル・モンスターズ
名探偵コナンマンハッタンシアター
「怪盗グルー」シリーズミニオン・パーク
ミニオンズ
ユニバーサル・スペクタクル・ナイトパレード ? ベスト・オブ・ハリウッド ?
ジュラシック・ワールドザ・フライング・ダイナソー
ユニバーサル・スペクタクル・ナイトパレード ? ベスト・オブ・ハリウッド ?
ジュラシック・パークジュラシック・パークエリア
ウォーターワールドウォーターワールド
ジョーズアミティ・ビレッジ
「ハリー・ポッター」シリーズウィザーディング・ワールド・オブ・ハリー・ポッター