※ 階級、職業は第1シーズン、または初登場時のもの。演の括弧内は日本語吹き替え。
レギュラー
ベンジャミン・シスコ
演 - エイヴリー・ブルックス(玄田哲章)
司令官(中佐→大佐)。地球人男性。
キラ・ネリス
演 - ナナ・ヴィジター(小宮和枝)
副司令官兼連絡将校(ベイジョー国民軍少佐→大佐)。ベイジョー人女性。
オドー
演 - ルネ・オーベルジョノワ(加藤精三)
保安主任(ベイジョー国民軍(階級なし))。流動体生物(可変種)。
ジャッジア・ダックス
演 - テリー・ファレル(佐藤しのぶ)
科学士官(大尉→少佐)。トリル人女性。共生生物ダックスの8番目のホスト。
ウォーフ
演 - マイケル・ドーン(銀河万丈)
戦術主任(少佐)。クリンゴン人男性。『新スタートレック』から継続出演。
ジュリアン・ベシア
演 - アレクサンダー・シディグ(藤原啓治)シーズン1-5、(中村大樹)シーズン6-7
医療主任(中尉→大尉)。地球人男性。
エズリ・ダックス
演 - ニコール・デ・ボア(石塚理恵)
カウンセラー(少尉→中尉)トリル人女性。共生生物ダックスの9番目のホスト。
マイルズ・オブライエン
演 - コルム・ミーニイ(辻親八)
技術主任(准尉)。『新スタートレック』より移動しての出演。
ジェイク・シスコ
演 - シロック・ロフトン(浪川大輔、石田彰、鈴木正和)
司令官の息子。
クワーク
演 - アーミン・シマーマン(稲葉実)
バー経営。フェレンギ人男性。ロムの兄。
セミレギュラー
ロム
演 - マックス・グローデンチック(山崎たくみ、田原アルノ)
ウェイター。フェレンギ人男性。クワークの弟そしてノーグの父親。
ノーグ
演 - エイロン・アイゼンバーグ(坂口賢一、岩永哲哉、山口勝平、落合弘治)