リーダーはアイアン・スパイダー。

アイアン・スパイダー（英語版）（アーロン・デイヴィス）

サンドマン

エレクトロ（フランシーヌ・フライ）

ホブゴブリン（ロデリック・キングスリー）

ボムシェル（英語版）

スポット（英語版）

新生シニスター・シックス（Newborn Sinister Six）
概要

1999年、ヴァルチャーとヴェノムが「スパイダーマンを倒す」という目的で同盟を組んだことにより、再結成される。
登場作品・活動
『スパイダーマン』
1999年に初対決。スパイダーマンの他に、ドクター・オクトパスやマッハ4（改心したビートル）などと闘う。
実写映画版
『アメイジング・スパイダーマン2』

本作のスピンオフ映画として、シニスター・シックスを主人公とした映画が計画されていたが、断念された。

ポストクレジットにて、グスタフ・フィアーズが「オズコープの技術を使った悪党軍団を結成する」と発言し、アレクセイをライノとし、登場予定であったスーパーヴィランのスーツのみ映される。
アニメ版

この節では、各アニメ版について説明する。従って、原作コミックとは違う設定となっている部分もある。

下記のメンバーは、各自のスーパーパワーがスパイダーマンを上回るスーパーヴィランが多い。さらに、チームワークを駆使するため、スパイダーマンは苦戦させられた。
スパイダーマン（1990年代版）

『スパイダーマン』第14話、第15話に登場。
メンバー
ドクター・オクトパス、ショッカー、ライノ、ミステリオ、スコーピオン（マック・ガーガン）、カメレオン。本作ではインシディアス・シックス(The Insidious Six)と呼称される。
劇中での活動
第14話（シーズン2第1話）にて、キングピンの画策で結成され、拘置されているスーパーヴィラン全員がメンバーとなった。ショッカーとライノは、初登場の段階で既にキングピンと繋がりがあった。ショッカーら5名は速やかにキングピンに従ったが、ドクター・オクトパスは参加を渋った[注 1]。当初、カメレオンがスパイダーマンに化け、残りの5人とスパイダーマンを誘き出す目的で悪事を働いていた。その為、J・ジョナ・ジェイムソンによりスパイダー・シックス（Spider-Six）と命名された。戦力的にはスパイダーマンを圧倒していた[注 2]。しかし、最後はスパイダーマンの機転によりチームワークを乱され、敗北。解散し、キングピンの傘下からも離れた。
備考
シーズン1には、クレイヴン・ザ・ハンター（原作コミック版初代メンバー）、ホブゴブリン（原作コミック版二代目メンバー）が登場していたが、インシディアス・シックスには参加していない（クレイブンは国外へ退去、ホブゴブリンはいずこかへ逃走している）。その他にシーズン1に登場したヴィランは、リザード、ヴェノム、キングピン、スパイダー・スレイヤー（スペンサー・スマイス、アリスター・スマイス）。ノーマン・オズボーンも登場したが、グリーンゴブリンはシーズン1には未登場。
刑務所での対応
ドクター・オクトパスは、コスチュームのまま、腰掛けた状態で独房に監禁されていた（4本の人工金属アームは、伸ばした状態で壁に固定）。ショッカーもコスチュームのまま収監されていた（衝撃波を発するパーツは取り上げられていた）。ミステリオはクェンティン・ベックの姿で収監されていた。
スペクタキュラー・スパイダーマン

『スペクタキュラー・スパイダーマン』シーズン1･第11話に登場。またシーズン2･第3話に新メンバーとして登場。
メンバー
シーズン1　ドクター・オクトパス、ショッカー、ライノ、エレクトロ、ヴァルチャー、サンドマン。リーダー格はドクター・オクトパス。シーズン2　クレイヴン・ザ・ハンター、ミステリオ、ライノ、エレクトロ、ヴァルチャー、サンドマン。
劇中での活動
第11話（シーズン1）にて、ビッグマン（トゥームストーン）の画策で結成された。拘置されているヴィラン全員がメンバーとなった[注 3]。初戦でスパイダーマンを圧倒したものの、再度の対戦でエイリアンスーツ（シンビオート）に敗北する（この時、ピーターの意識はなかった）。なお、スパイダーマンは前話からブラックコスチューム（エイリアンスーツ）を着用している。