2ちゃんねるや2ちゃんねらーに対し、反感・危機感・恐怖感・妬みを持つ者は多い。その中でも特に反発感情が過ぎる者は、「アンチ2ちゃんねらー」又は「反2ちゃんねらー」などと呼ばれ、逆に彼ら自体が問題視されることもある。一部のアンチ2ちゃんねらーは、場所を構わずアンチ論を掲げ、場の空気を乱すことも少なくない。根拠のない決め付けにより、2ちゃんねるや2ちゃんねらーを批判することもあり、その点では根拠のない誹謗中傷をする2ちゃんねらーに準じて、周囲にとっては迷惑である。特に2ちゃんねるの一部のスレッドでは、中国・韓国・北朝鮮（いわゆる“特定アジア”）に批判的な意見、右翼的な言説が主流となっていることから、それらの意見に反発する者が反感を抱くこともある。
2ちゃんねるに反感を持つユーザの多くは、「匿名制」自体には反対ではない。その中には左翼・左派、社民党支持者、フェミニスト、女性団体、東アジア系外国人（在日コリアンなど日本生まれの在日外国人）、2ちゃんねるで槍玉にあがっている企業関係者などが含まれる。2ちゃんねるには従来のマスコミに批判的なユーザが多数存在するため、自らの方針と異なる意見の新たなる発信場所として2ちゃんねるを警戒視するマスコミ関係者は多い。
また、「あやしいわーるど」や「あめぞう」などの一部の利用者は2ちゃんねるを極度に嫌っており、批判や罵倒、嫌がらせを行う。はてなダイアリーやmixi、スラッシュドットなどにも、2ちゃんねるに強い反感を持つユーザーが少なからず存在する。そして、2ちゃんねる内でもアンチ2ちゃんねらーが存在する。
2ちゃんねるが持つ匿名性により、一般に公表できないような特殊な趣味を持つ人が集まるスレッドも多く存在する。
板によっては、ある特定の事件に関わっていると見られる個人のプライバシー探りを行い、2ちゃんねるのニュースカテゴリの板でそれを公開する人も相当数存在・または発生する。テレビや雑誌ではモザイク処理がかかっている部分の情報を調べて書き込みをしたり、未成年犯罪者の顔写真をどこからか探し出して来て掲載したり、自宅の住所まで調べ書き込みをしたりする者がいる[1]。
また、「（2ちゃんねるは）匿名だから自由な発言ができる」と主張しながら、他のサイトに乗り込んで言論封殺に近い行為[2]を行う者、またランキング投票サイトであからさまなウケ狙いと思われる項目を追加した上で「うはwwwおkwww」などとコメントを付ける者もいる。
「明日○○を爆破します」「明日○○を殺します」といった犯罪予告を書いたり、いき過ぎた誹謗中傷を行なったり、動物虐待を生中継で書き込みする者が現れ、2ちゃんねる側から警察側にログを提出した後に当人が逮捕されるケースが、定期的に発生していた時期があった。そのような書き込みが2ちゃんねるを舞台に多発した結果、このような『犯罪性のある書き込み』は運営側に通報することで誰が書き込んだのかが明らかにされるようになった。
しかしこれまでに犯罪予告を通報することで事件を未然に防いだというケースはなく、犯罪予告によって逮捕された人間は全てイタズラである。
現在進行のイベントや事件などについて、2ちゃんねらーが異常な盛り上がりを見せる状態を「祭り」と呼ぶ。2ちゃんねるではニュース速報板、ニュース速報(VIP)板やネットウォッチ板などで多く発生し、その他の板で発生することはまれである。
「祭り」は、彼らがニュースやインターネット上のウェブサイト、ブログやSNSなどから「祭りを起こすネタ」[3]を2ちゃんねる内で取り扱い、多くの人間により（ブログやSNSなどに関しては、主にネットウォッチ板の住民による）様々な行動にでる、という流れで起こる。この結果、サイト上は殺到した2ちゃんねらーによって批判的なコメントが集中砲火的に寄せられ、時にはサーバのダウンを引き起こすこともある。いわゆる「炎上」である。執筆者のその後の対応によっては、さらに2ちゃんねらーを挑発することとなり、事態が悪化することもある。その結果、「祭り」の被害にあった者は、精神的な損失の他、場合によっては社会的な損失（失職・逮捕・損害賠償など）を被る場合もある。
「祭り」に加わるような一部の2ちゃんねらーは、やり玉に挙げられる相手のことを考慮することなく、彼らから見て不愉快な対象を積極的に見つけ出し、その対象を糾弾という大義名分のもとで2ちゃんねるの掲示板や対象者のブログ等で大勢の人間で罵倒する傾向が強い。しかもそれは、「祭りだワッショイ」などの言葉に代表されるように往々にして遊び感覚であり、一部の2ちゃんねらーは思想や意見の違う者のブログやウェブサイトに攻撃することを正当化して、これらの行為を批判する者に対しても攻撃を行うことがある。また、「非があるのだから何をされても文句は言えない」といった言いがかりのような理由づけで、「晒し」（対象の未開示個人情報などを2ちゃんねる上で公開すること）や、威力業務妨害などその他不法行為に及ぶケースがしばしば発生する。
特に2007年頃には、Winny利用の際にキンタマウイルスなどで流出したわいせつ写真や個人情報などを板に掲載し、流出した男性や女性を罵倒するといった「祭り」が定期的に発生しており、プライバシー問題に触れる行為が行われている。
いわゆる「靖国問題」のクローズアップ以降、2005年の終戦記念日に20万人を超える参拝者を記録するなど靖国神社への国民の関心は大きく高まっているが、2ちゃんねるでも靖国参拝を呼びかける運動が行われており、「靖国問題」を政治問題化するアジア3か国と同様の報道を行うマスコミを強く非難している者も多い。またワールドカップ日韓大会においては、共催国である韓国についての報道が偏向的・あるいは擁護一辺倒とも取れる内容であったこととして、マスコミ不信が拡大し、朝日新聞やフジテレビなどがアジア3か国寄りの報道を行うマスコミとして非難が噴出した。 その一方で、現役の右翼活動家によるネット内部での工作活動が指摘されており、管理人の西村博之もそのことを示唆する発言をしている。
匿名による気安さもあって、冗談か本気かは様々であるが、突出した意見を述べる2ちゃんねらーは多い。ネオナチ思想、民族浄化、選民思想を掲げて、部落出身者・在日コリアンを筆頭とした在日外国人や障害者、低学歴、オタク、30代以上の高慢な女性、あるいはこれらに対して好意的な論者などを排除・抹殺すべき対象だと唱える、過激な書き込みもある。人権問題板などでは、人権は日本社会には不要と唱える人間もいる。