1876年創設のナショナルリーグと1901年創設のアメリカンリーグからなり、2007年現在全30球団がある。球団数は1901年から1960年までは16球団だったが、1961年に18球団に増えたのを皮切りに、20→24→26→28と増え、現在の30球団になったのは1998年のことである。地区制度は1969年にまず2地区制で導入され、1994年からは3地区制になった。
アメリカンリーグの西地区が4球団で少ないため増やそうという話があったが、試合を構成する上で総球団数を偶数にせざるを得ないため（偶数でないと全球団で同じ日に試合を行うという構成にすることができない）、他に同じような動きがないために現在の所保留されているという話である。
リーグ優勝チーム同士のシリーズ試合（優勝決定戦）はワールドシリーズと呼ばれる。
メジャーリーグベースボール機構では、アメリカ合衆国やカナダ以外での公式戦開催を推進している。日本では2000年と2004年、2008年に公式戦開幕シリーズを東京ドームで開催した（2003年にも予定されていたが、イラク戦争の影響で中止となった）。今後も日本での公式開幕戦が開催される可能性がある。
アメリカ国内にはMLB傘下にない、複数のプロ野球チームが1つのリーグを構成しており、これを特に独立リーグとよんでいる。また、このほかにも黒人の野球選手のみで構成されたニグロ・リーグ、1914年〜1915年には、フェデラル・リーグと呼ばれる第3のリーグが存在したが、いずれも現在は廃止されている。
アメリカ合衆国外からの参加は2005年にモントリオール・エクスポス（カナダ）がワシントンD.C.に本拠を移転し「ワシントン・ナショナルズ」となったため、現状はトロント・ブルージェイズ（同じくカナダ）の1球団のみとなった。
メジャーリーグでは、野球の記者が選手にサインを求めることは禁じられている。
西地区中地区東地区
ロサンゼルス・エンゼルス
オークランド・アスレチックス
シアトル・マリナーズ
テキサス・レンジャーズ
シカゴ・ホワイトソックス
クリーブランド・インディアンス
デトロイト・タイガース
カンザスシティ・ロイヤルズ
ミネソタ・ツインズ
ボルティモア・オリオールズ
ボストン・レッドソックス
ニューヨーク・ヤンキース
タンパベイ・レイズ
トロント・ブルージェイズ
西地区中地区東地区
アリゾナ・ダイヤモンドバックス
コロラド・ロッキーズ
ロサンゼルス・ドジャース
サンディエゴ・パドレス
サンフランシスコ・ジャイアンツ
シカゴ・カブス
シンシナティ・レッズ
ヒューストン・アストロズ
ミルウォーキー・ブルワーズ
ピッツバーグ・パイレーツ
セントルイス・カージナルス
アトランタ・ブレーブス
フロリダ・マーリンズ
ニューヨーク・メッツ
フィラデルフィア・フィリーズ
ワシントン・ナショナルズ
MLBのチーム分布と所属リーグおよび地区
